DIM对人激素非依赖性前列腺癌细胞PC3M的生长抑制作用

目的：探讨3,3-二吲哚基甲烷(3,3-Diindolylmethane,DIM) 对人激素非依赖性 前列腺癌细胞PC3M的生长抑制作用。方法：应用MTT生长抑制实验观察不同浓度DIM对PC3M细胞增殖活性的影响，流式细胞术观察不同浓度DIM对PC3M细胞的细胞周期及细胞凋亡的影响。结果：不同浓度的DIM对PC3M细胞有显著的增殖抑制作用（P<0.05），药物浓度为10、30、60和120 μmol•L^-1时，抑制率分别为35.6%、58.8%、76.6%和90.5%。当 药物浓度为60 μmol•L^-1时，细胞周期停滞在G₁期，并诱导22.6％的PC3M细胞发生凋亡。结论：DIM可抑制PC3M细胞增殖，并诱导其凋亡，为DIM用于激素非依赖性前列腺癌的治疗提供了实验依据。     

吗啡对PC12细胞嘌呤核苷酸代谢相关酶基因表达的影响

目的：研究吗啡对神经细胞模型PC12嘌呤核苷酸补救合成酶与分解代谢关键酶基因表达的影响。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测暴露于吗啡不同时间的PC12细胞次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）、腺苷激酶（AK）和腺苷脱氨酶（AD A）mRNA的表达水平。结果：与相应时段对照组相比，PC12细胞暴露于吗啡12及24 h时，HGPRT mRNA水平均明显增高(P<0.05)，作用48 h时HGPRT mRNA水平显著降低(P<0.05)，72 h后HGPRT mRNA水平再次升高(P<0.05)；吗啡处理的PC12细胞于12和24 h时，AK mRNA水平均明显降低(P<0.05)，作用48 h时AK mRNA水平升高(P<0.05)，72 h后AK mRNA水平恢复正常；ADA mRNA水平均表现为轻度降低，12 h差异有显著性(P<0.05)。结论：吗啡影响神经细胞嘌呤核 苷酸代谢，使细胞内腺苷酸及腺苷水平增高，这可能是吗啡依赖和耐受形成的机理之一 。     

输血传播病毒样微小病毒基因检测

目的：测定慢性肝炎患者体内输血传播病毒(TTV)样微小病毒（TLMV）的全基因序列，并研究人群中TLMV感染状况。方法：采用日本学者Shunji Mishiro提供的序列选择TLMV-CBD279和CBD-231最保守区设计引物，用慢性乙型肝炎且TTV阳性患者血清制备DNA模板，进行PCR扩增；将阳性PCR产物连接至pGEMR-T质粒，碱裂解法提取质粒DNA并纯化。以T7 引物为起 始全自动荧光测序仪测序。结果：获得162bp基因序列，该序列与日本株CBD231、CBD279同源性为72%，丙型肝炎患者及健康献血员感染率最高。结论：在＊慢性乙型肝炎患者体内存在TLMV感染。     

高脂血症患者氧化修饰低密度脂蛋白对内皮依赖性血管舒张的影响

目的：探讨氧化修饰低密度脂蛋白（Ox-LDL）对血管舒张的影响及高脂血症男性患者易患动脉粥样硬化（AS）的机制。方法：采用Cu^2＊ 对13例健康自愿者及29例高脂血症患者的低密度脂蛋白(LDL)进行氧化修饰，硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量，Bartlett法测定溶血卵磷脂(LPC)含量，乙酰胆碱诱发血管舒张。结果：健康人和高脂血症患者血浆LDL被氧化修饰后与修饰前比较MDA含量显著增高（P<0.01）；两组Ox-LDL中的LPC水平均 明显高于各自天然低密度脂蛋白(N-LDL)中的LPC水平（P<0.05）；且健康人及高脂血症男性患者N- LDL中的LPC含量与女性基本相同，但两组男性Ox-LDL中的LPC含量高于女性（P<0.05）,男性高脂血症患 者Ox-LDL的LPC含量最高；两组Ox-LDL均明显抑制血管内皮依赖性舒张，与女性相比，健康男性Ox-LDL抑制血管舒张程度略强，但高脂血症男性患者Ox-LDL抑制血管舒张程度明显增强。高脂血症男性及女性患者Ox-LDL的抑制血管舒张效应与LPC量呈正相关（r ＝0.592，P<0.05；r＝0.816，P<0.05)。结论：男性高脂血症患者易患AS可能与Ox-LDL增加LPC含量及抑制内皮依赖性血管舒张有关。     

三种不同处理因素下托槽粘接强度的对比

目的：研究3种不同处理因素下托槽粘接强度的化。方法：选正畸需要而拔除的60颗双尖牙为实验样本,随机分为3组,每组20颗。对每一牙面粘接标准方丝弓托槽。以材料力学实验机测定各组24 h后抗剪切强度及抗张强度,并对每一牙面上的粘接剂残留量进 行统计。结果：粘接托槽前使用抛光膏清洁牙面，能显著提高托槽粘接的抗剪切强度［非抛光组为(5.973±1.519)MP，两个抛光组分别为(9.017±3.278)和(7.862±2.437)MP，P<0 .05］。抛光膏清洁牙面后，使用光固化氟化玻璃离子复合体粘接托槽，粘接的抗剪切强度有显著提高，与京津釉质粘接剂粘接的抗剪切强度比较差异无显著性，但抗张强度较京津釉质粘接剂显著降低（P<0.05）。ＡＲＩ积分比较，抛光膏清洁牙面能显著提高釉质表面与粘接剂间的粘接力（P<0.05），尤其在抗张强度组影响更显著（P<0.01）。抛光膏与光固化氟化玻璃离子复合体配合使用，抗张强度组牙釉质表面与粘接剂间的粘接力显著提高（P<0.05）。结论：牙面抛光膏及光固化氟化玻璃离子复合体可应用于正畸临床的托槽粘接。     

碘标记神经生长因子在缺氧新生鼠脑内的吸收

目的观察碘标记神经生长因子(125I-NGF)在缺氧新生鼠脑内的吸收情况。方法选取32只7日龄健康新生鼠随机分成实验组(125I-NGF组和125I组)及正常组(125I-NGF组和125I组),实验组制成缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型。分别予125I-NGF和单纯125I腹腔注射后30 min处死取脑,按如下解剖分出基底前脑、额皮质、海马、丘脑下区、小脑、嗅球、垂体,对标本进行放射性测量。结果两125I NGF组于基底前脑、小脑、额皮质、海马、嗅球均有显著吸收,且NGF在缺氧鼠额皮质、海马、小脑吸收显著高于NGF在正常新生鼠以上部位。结论外源性NGF可透过新生鼠血-脑脊液屏障,早期应用治疗HIE是可行的。     

逆转录PCR方法检测HoxA族基因在胶质瘤细胞C6中的表达

背景与目的：同源盒基因是生物发育调节的主控基因，具体作用体现在调控DNA的转录过程。近年来已发现多种恶性肿瘤中有不同种类的同源盒基因异常表达。胶质瘤中同源盒基因的表达尚未全部确定。本研究旨在观察胶质瘤细胞C6中异常表达的同源盒基因中HoxA族基因的种类。方法：应用HoxA族基因特异引物，对原代培养大鼠正常脑组织星形胶质细胞和胶质瘤C6细胞进行逆转录PCR。结合图像分析法分组检测HoxA族11种基因mRNA的表达水平。统计分析比较两种细胞中HoxA族基因表达水平。Hox基因表达水平用基因／β-肌动蛋白（β—actin）灰度比值表示。结果：HoxA3、A5、A6、A7、A9、A11、A13基因在正常脑组织和C6细胞中表达没有显著差异；HoxA1基因在正常大鼠和胶质瘤细胞C6中表达虽有显著差异，但均为弱表达；HoxA4基因在正常脑组织中弱表达，在C6细胞中有明显表达，二者比较，差异显著（P〈0.01）；HoxA2、HoxA10基因在正常大鼠脑组织中未见表达，在胶质瘤细胞c6中有明显表达。结论：HoxA2、A4、A10基因mRNA表达增高，可能与胶质瘤的发生、发展相关。     

悦肝胶囊对肝纤维化大鼠防治作用的实验研究

目的:观察悦肝胶囊对二甲基亚硝胺(DMN)模型大鼠肝纤维化形成的影响,探讨悦肝胶囊抗肝纤维化的作用机制。方法:模型制备采用DMN4周12天腹腔注射,实验组分别用大、中、小剂量悦肝胶囊干预,干扰素对照。生化测定肝组织羟脯氨酸含量(HYP);免疫组织化学方法观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)的表达情况;通过天狼猩红染色和HE染色观察肝组织胶原沉积情况及病理变化。结果:与模型对照组相比,悦肝胶囊可有效改善肝组织胶原沉积,降低肝组织HYP含量,抑制肝组织α-SMA和TIMP-1表达,对MMP-1表达影响微弱,无差异。结论:提示悦肝胶囊具有保肝和抗肝纤维化作用,作用机制可能与其抑制肝星状细胞(HSC)活化,减少胶原合成,同时促进胶原分解有关。     

中心组合设计优化法筛选独一味分散片制备工艺

 目的　中心组合设计法优化独一味分散片制备处方。方法　采用粉末直接压片,以分散片崩解时间、木犀草苷溶出的t₈₀及分散片混悬后的混悬系数为考察指标,应用中心多点等距设计法及效应面优化法对独一味分散片处方进行筛选,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,选取较佳工艺,并进行预测分析。结果　考察指标与各因素间具有较好的相关性,优化后独一味分散片处方为12％PVPP为崩解剂、14％预胶化淀粉为溶胀剂、3％微粉硅胶为润滑剂和助流剂、45％MCC为填充剂。优化条件下制备的分散片崩解时间为20.6s,木犀草苷溶出的t₈₀为1.68 min,分散片混悬后的混悬系数为0.068 9。结论 中心组合设计法具有应用简便、预测性好等优点,筛选的处方可以在最适宜的范围内制备一定硬度且具有可被接受口味的速释分散片。     

Transplantation of Aire-overexpressing bone marrow-derived dendritic cells delays the onset of type 1 diabetes

Autoimmune regulator (Aire) plays an indispensable role in maintaining central immune tolerance by promoting the ectopic expression of tissue-restricted antigens (TRAs) in medullary thymic epithelial cells (mTECs) and dendritic cells (DCs), which lead to the deletion of autoreactive T cells or the induction of Tregs and consequently prevent autoimmune disease development. Curing autoimmune diseases has always been a challenge. DC-based immunotherapy represents a new and effective method to establish tolerance. We attempted to transplant Aire-overexpressing bone marrow-derived DCs (Aire-BMDCs) to treat type 1 diabetes (T1D) and to explore a new strategy for autoimmune disease treatment. We observed that the onset of T1D in recipient mice was delayed; insulin autoantibody (IAA) production was significantly decreased; the structure of islets was protected; and the degree of inflammatory infiltration was lower. Furthermore, we found that Aire-BMDCs can promote apoptosis and induce autoreactive CD4⁺ T cell clonal anergy, inhibit Th1 and Th17 production, and induce Treg production. These results suggest that transplantation of Aire-BMDCs will be a manipulation and effective method for preventing or treating T1D.